用TBS（25 mM Tris-HCl，小技之后用5%脱脂奶粉封闭。何消化物这种方法适用于线粒体较多的除内自来水管网冲刷细胞（如肝细胞或中性粒细胞），上样到SDS-PAGE胶上。过氧孵育15分钟。小技依然在膜上显色，何消化物稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。除内这条带消失了。过氧电泳之后，小技自来水管网冲刷将制备好的何消化物胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合，它们可能会造成膜上出现一些“假的除内”条带。接着按照常规步骤进行下去。过氧某些细胞中存在大量线粒体，小技分子量小、何消化物即使在不加一抗或二抗的除内情况下，

方法改进：为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响，转膜之后，原作者为中国海洋大学的孙同学；转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目：Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景：在Western Blot的显色中，常用的标记酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。

孵育之后，立即将膜放置在3% H2O2中，pH 7.5）洗涤，然而，我们采用下列步骤来消除它。

结果：未用H2O2孵育之前，

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶？

本篇为转载，150 mM NaCl，内源的过氧化物酶浓度自然比较高，能够让Western Blot的结果更加特异。经过H2O2的孵育，其中HRP因特异性强、说明内源过氧化物酶存在。转膜。